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哺乳动物细胞蛋白表达服务
哺乳动物细胞系统蛋白表达是广为应用的人类复杂糖基化蛋白的表达系统,也是活性蛋白因子及各类受体蛋白的优异表达系统,具有翻译后修饰功能,适用于各类修饰蛋白的蛋白,通过构建信号肽使成熟的蛋白分泌到胞外,利用亲和纯化的方式可较为轻松的获得高活性的蛋白。表达的重组蛋白在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近天然的高等生物蛋白质分子。
碣石生物主要以CHO(中国仓鼠卵巢纸胞)和HEK293(人胚肾细胞)为表达宿主进行悬浮培养,可生产出毫克至克级的重组蛋白。我们拥有达到自建细胞房和自主研发的哺乳动物细胞高表达载体,结合定向驯化的哺乳动物细胞,可以实现蛋白/抗体的规模化生产。我们提供哺乳细胞瞬时转染和稳定转染两种方式制备蛋白/抗体。
系统优势
(1)无自产内毒素;
(2)可以分泌表达;
(3)具有复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能;
(4)在分子结构、理化性质和生物学功能等方面,哺乳动物细胞表达的蛋白最接近于天然蛋白。
服务优势
经验丰富:超10年蛋白表达经验,哺乳表达蛋白3000+,包含各种类型的蛋白
高成功率:cGMP标准的细胞房,多项专有实验技术,实验成功率大于98%
自主研发:高表达培养策略,高表达载体,高密度细胞培养技术
一站式服务:从密码子优化到蛋白达标纯化的一站式服务
体系选择
瞬时传染 | 稳定传染(稳转株构建) |
1、细胞:HEK293或CHO 2、周期:快至5周 3、表达量:毫克/升 4、交付:毫克级蛋白 | 1、细胞:CHO 2、周期:cell pool 2月,单克隆5月 3、表达量:毫克-克/升 4、交付:cell pool或单克隆细胞株 |
宿主细胞选择
CHO细胞 | HEK293细胞 |
中国仓鼠卵巢细胞 (Chinese Hamster Ovary cell) | 人胚胎肾细胞 (Human Embryonic Kidney 293 Cell) |
鼠源蛋白或抗体、治疗性蛋白或抗体有限选择 | 人源、猪源、兔源等物种来源的蛋白或抗体优先选择 |
难传染,传染效率低 | 易传染,传染效率高 |
瞬时表达和稳定表达 | 瞬时表达 |
细胞生长速度慢 | 细胞生长速度快 |
很少分泌外源蛋白,利于分离纯化 | 细胞生长密度高,蛋白表达量高 |
服务内容
服务内容 | 实验步骤 | 实验周期 | 交付材料及数据 | 价格 |
表达载体构建 | 1.基因合成 | 1~2周 | 1、基因合成报告 2、测序验证报告 3、包含表达质粒的DH5α克隆菌株 | 哺乳动物蛋白表达服务属于科研型服务项目,为了给您提供更专业,更细致的服务支持 请咨询客服 |
2.亚克隆至真核表达载体中 | ||||
3.测序验证重组质粒 | ||||
瞬时转染小试 | 1.无内毒素质粒抽提 | ~2周 | 4、蛋白生产完整流程报告 5、蛋白质检报告 6、所有原始图片 7、发货蛋白 | |
2.细胞瞬时传染 | ||||
3.表达小试 | ||||
4.表达分析鉴定(WB) | ||||
扩大表达与纯化鉴定 | 1.扩大培养细胞并传染 | |||
2.表达上清液浓缩 | ||||
3.蛋白/抗体分离纯化 | ||||
4.PAGE分析纯化过程 | ||||
5.WB鉴定纯化后蛋白 |