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Co-Ip 免疫共沉淀实验服务
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
蛋白质控制了细胞中的所有生物系统，通常它们不是独立作用，绝大多数蛋白质会与其他蛋白质相互作用，一起参与生命过程。免疫共沉淀是研究蛋白与蛋白互作的一种常用的方法，其原理基于抗原-抗体免疫反应，利用抗体结合于琼脂糖磁珠上的Protein A/G，在蛋白液中加入抗原特异的抗体进行孵育，当抗体免疫沉淀抗原蛋白时，能与抗原蛋白结合的目的蛋白一并被沉淀下来，形成“靶蛋白+诱饵蛋白+诱饵蛋白抗体+Protein A/G”免疫复合物，经免疫印迹或质谱检测互作的蛋白。
服务优势
l 成功率高：使用进口试剂盒进行实验，Protein A/G磁珠吸附效高，实验成功率90%以上。
l 灵敏度高：采用银染和免疫印迹法技术，条带更清晰，实验结果更可靠。
l 设备完善：拥有液相质谱及Fortebio等完整配套检测设备，可对检测结果进一步分析;
l 准确率高：成熟的实验机制，科学的对照组设置，最大程度保证实验结果的准确性。
l 一站式服务：立体化的上下游服务体系，完善的基因、蛋白和抗体服务平台，真正的一站式服务体验。
免疫共沉淀检测原理
免疫共沉淀是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein G或A能特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入感兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于磁珠的Protein G或A，若细胞中存在与兴趣蛋白相结合的目的蛋白，就可以形成蛋白复合物：“靶蛋白+诱饵蛋白+诱饵蛋白抗体—Protein G或A”；最后通过免疫印迹实验来检测目的蛋白。
免疫共沉淀应用
l 测定两种目标蛋白质是否在体内结合；
l 鉴定与特定蛋白相互作用的未知蛋白（通常与质谱连用，也称IP-MS）；
l 分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
免疫共沉淀服务流程
免疫共沉淀服务内容
服务项目 | 服务内容 | 周期 | 交付 | 价格 |
Co-IP验证型 | 样本中诱饵蛋白和靶蛋白的WB检测 | 1-2周 | Co-IP实验报告 所有原始图片 | 免费咨询客服询价 |
Co-IP验证诱饵蛋白及靶蛋白的互作结果 | ||||
Co-IP筛选型 | 样本中诱饵蛋白的WB检测 | 1-2周 | Co-IP实验报告 所有原始图片 | |
Co-IP筛选与诱饵蛋白存在互作的未知蛋白 | ||||
LC-MS/MS检测及数据分析（可选） | 2-3周 | 质谱检测结果及报告 互作蛋白筛选表格 |
注：如果客户提供序列，由碣石负责诱饵蛋白或靶蛋白的制备，最终在交付互作分析报告的同时，也会交付>85%纯度的蛋白、质粒、菌株以及对应的蛋白报告。
样品类型 | 样品需求 | 保存条件 | 运输条件 | 备注 |
动物组织 | 1、单个样品>1g，EP管或冻存管装，不要过量。 2、样本应尽量新鲜，如不能立即提取蛋白或核酸，应液氮速冻后冻存于-80℃或更低。 3、冻存样本避免反复冻融以致降解。 | -80℃ | 干冰 | 所有样本均须有唯一标记，且标记清晰可识 |
种子样本 | 去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本，单个样品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
贴壁/悬浮细胞 | 1、总RNA或蛋白：106cell/指标 2、浆/核RNA或蛋白：107cell/指标、线 3、粒体RNA或蛋白：2*107 cell/指标， 4、样本尽量新鲜，细胞收取后直接加Trizol（QPCR检测）或直接冻存于-80℃ 5、若细胞处理（加药、转染、感染）后状态差应酌情加大收样量 | -80℃ | 干冰 | |
全血/血清样品 | 1、用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml； 2、-80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
抗体 | 1、按样本种属提供满足相应实验要求的抗体； 2、按抗体说明书要求寄送，尽量避免分装；如分装，确保量足够进行实验，并提供抗体说明书。 3、保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记，抗体的量应大于实验所需的量。 | -20℃ | 冰袋 |
免疫共沉淀的优缺点
免疫共沉淀的优点 | 免疫共沉淀的缺点 |
相互作用的蛋白处于天然状态，都是经过翻译后修饰的 | 检测不到弱亲和力和瞬时的蛋白相互作用 |
可以分离得到天然状态下的相互作用蛋白复合物 | 蛋白的相互作用可能不是两者直接结合，可能存在第三方的桥梁作用 |
可以检测体外和细胞内的相互作用 | 须在实验前预测目的蛋白，以选择最后检测的抗体，否则实验得不到结果 |
假阳性率较高，试验需要设置正确的对照 |