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稳定细胞系构建服务
研究某个基因的功能最常用的手段是在宿主细胞中过量表达或者通过RNA干扰的方法knock-down该基因,常规手段有瞬时转染和筛选稳定细胞系。稳定细胞株已广泛应用于重组蛋白和抗体生产、检测分析、免疫治疗药物开发等研究领域,表达的蛋白/抗体稳定性更好、批次间差异小,是生物医药研发的基础。
碣石生物具有全面的稳定细胞系开发能力,从您提供的基因序列开始,经过基因构建、细胞转染、cell pool筛选,直至筛选到稳定高表达的单克隆细胞株。高表达稳定细胞系的筛选需要通过多水平的分析和考量,我们会从细胞水平、蛋白表达水平和基因水平进行评价分析,帮您筛选出最优的单克隆。我们的高表达稳定系构建,产量可达克级每升。
服务优势
高质:外源基因严格鉴定,细胞来源清晰,无污染
高产:重组蛋白/抗体表达量可快速优化至2g/L 以上稳定表达
稳定:独有的Gs稳转系列载体配合MSx药物筛选,实现稳定传代15代以上
快速:筛选高产细胞株,周期短至3个月
灵活定制:可针对重组蛋白/抗体全长或片段进行个性化表达
经验丰富: 专业的技术团队,已成功为国内外多家医药公司和研究单位构建交付稳定细胞株。
多筛选系统:G418/潮霉素/嘌呤霉素筛选系统,GS/DHFR筛选系统等。
服务内容
服务内容 | 实验步骤 | 试验周期 | 交付材料及数据 | 价格 |
表达载体构建 | 1、基因合成 | 2-3周 | 1、基因合成报告 2、测序验证报告 | 免费咨询客服询价 |
2、亚克隆至真核表达载体中 | ||||
3、测序验证重组质粒 | ||||
瞬时表达评估 | 4、瞬时表达 | 2-3周 | 4、评估报告 | |
5、ELISA 及/或WB检测表达水平 | ||||
稳定细胞株开发 | 6、稳定转染及筛选 | 15-18周 | 5、实验流程报告 6、高表单克隆细胞株(1×107cells/ml,1ml)或 cell pool(1×107cells/ml,1ml) | |
7、高表达克隆筛选及稳定性筛选 | ||||
8、细胞建库 | ||||
蛋白制备(可选) | 9、蛋白纯化 | 2-3周 | 7、重组蛋白 8、蛋白质流程报告 9、蛋白质质检报告 | |
10、蛋白质检 |